23793774
Description
Mind Map by Sebas Pacheco, updated more than 1 year ago
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Created by Sebas Pacheco
over 4 years ago
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Métodos de
Inmunoensayos
- Es un conjunto de técnicas inmunoquímicas analíticas de laboratorio que
tienen en común el usar complejos inmunes, es decir los resultantes de la
conjugación de anticuerpos y antígenos, como referencias de
cuantificación de un analito
- Tipos
- Por la técnica de
medición
- Competitivo
- El Antígeno (Ag) objeto de la
medición compite con un antígeno
marcado por un anticuerpo (Ac). Se
mide por la cantidad del antígeno
marcado sin conjugar que se
considera es inversamente
proporcional al analito.
- El Antígeno (Ag) objeto de la
medición compite con un antígeno
marcado por un anticuerpo (Ac). Se
mide por la cantidad del antígeno
marcado sin conjugar que se
considera es inversamente
proporcional al analito.
- No competitivo
- el Ag de la muestra reacciona con dos
Ac diferentes que se fijan a distintas
partes del Ag . Uno de los Ac
generalmente está en soporte sólido
para facilitar la separación de la
fracción ligada, y el otro Ac lleva la
marca. Se mide por la cantidad del
marcador considerando que es
directamente proporcional a la
cantidad del analito.
- el Ag de la muestra reacciona con dos
Ac diferentes que se fijan a distintas
partes del Ag . Uno de los Ac
generalmente está en soporte sólido
para facilitar la separación de la
fracción ligada, y el otro Ac lleva la
marca. Se mide por la cantidad del
marcador considerando que es
directamente proporcional a la
cantidad del analito.
- Competitivo
- Por el medio donde se realiza la medición
- Homogéneo
- En este tipo de ensayo la
señal generada por la
unión del antígeno y el
anticuerpo se mide
directamente en el
mismo medio que se
utiliza para favorecer la
formación del complejo
inmune.
- En este tipo de ensayo la
señal generada por la
unión del antígeno y el
anticuerpo se mide
directamente en el
mismo medio que se
utiliza para favorecer la
formación del complejo
inmune.
- Heterogéneo
- En este tipo de ensayo la señal
generada por la unión del
antígeno y el anticuerpo se mide
en un medio diferente que el
utilizado para la unión del
complejo inmune, generalmente
implican una etapa intermedia
de lavado para eliminar
interferencias.
- En este tipo de ensayo la señal
generada por la unión del
antígeno y el anticuerpo se mide
en un medio diferente que el
utilizado para la unión del
complejo inmune, generalmente
implican una etapa intermedia
de lavado para eliminar
interferencias.
- Homogéneo
- Por el marcador
- Radioinmunoensayo (RIA)
- Es un tipo de inmunoensayo que se basa en la formación
específica de los complejos antígeno-anticuerpo (Ag-Ac) lo que
le dota de una gran especificidad unido a la sensibilidad de los
métodos radiológicos (Isótopos radiactivos).
- RIA directo
- Se basa en la competencia
existente entre el
anticuerpo, un antígeno
no marcado y una
cantidad conocida del
antígeno marcado para
formar los
complejos AgAc o Ag*Ac
- Con estos tres componentes (Ag, Ag* y Ac)
puede realizarse el ensayo en el que
manteniendo constante la cantidad de Ag*
y Ac se observará que a mayor cantidad de
Ag menos Ag* queda unido a la cantidad
fija de Ac (y por tanto menos radiactividad)
- Con estos tres componentes (Ag, Ag* y Ac)
puede realizarse el ensayo en el que
manteniendo constante la cantidad de Ag*
y Ac se observará que a mayor cantidad de
Ag menos Ag* queda unido a la cantidad
fija de Ac (y por tanto menos radiactividad)
- Se basa en la competencia
existente entre el
anticuerpo, un antígeno
no marcado y una
cantidad conocida del
antígeno marcado para
formar los
complejos AgAc o Ag*Ac
- RIA de inhibición
- Técnica competitiva de análisis,
pero lo que se une a la fase
solida es una cantidad fija de
antígeno. Para el proceso de
inhibición, se incuba una
concentración fija de
anticuerpo marcado frente a
una serie de diluciones de la
muestra que contiene el
antígeno.
- Técnica competitiva de análisis,
pero lo que se une a la fase
solida es una cantidad fija de
antígeno. Para el proceso de
inhibición, se incuba una
concentración fija de
anticuerpo marcado frente a
una serie de diluciones de la
muestra que contiene el
antígeno.
- RIA de sándwich (IRMA)
- Técnica no competitiva. Se
une a un Ac en
concentraciones variables.
Posteriormente se añade
un segundo anticuerpo
contra el antígeno, pero
esta vez marcado
- Técnica no competitiva. Se
une a un Ac en
concentraciones variables.
Posteriormente se añade
un segundo anticuerpo
contra el antígeno, pero
esta vez marcado
- RIA directo
- Es un tipo de inmunoensayo que se basa en la formación
específica de los complejos antígeno-anticuerpo (Ag-Ac) lo que
le dota de una gran especificidad unido a la sensibilidad de los
métodos radiológicos (Isótopos radiactivos).
- Fluoroinmunoensayos
(FIA)
- Se basa en el uso de colorantes o moléculas fluorescentes que deben ser
estables para marcar inmunocomplejos y no interferir en la formación del
complejo antígeno anticuerpo. Los fluorocromos más utilizados son la
rodamina y la fluoresceína, que son capaces de absorber energía a una
longitud de onda
- (FIA) Heterogéneos
- Necesitan una separación
de las fracciones libre y
ligada del antígeno
marcado. Además, las
propiedades de la
fluorescencia no son
diferentes dependiendo
de si el antígeno se
encuentra unido o no al
anticuerpo
- Homogéneos
- En el caso de los homogéneos las
características de la fluorescencia
cambian según si el antígeno y el
anticuerpo se encuentran libres o
unidos
- En el caso de los homogéneos las
características de la fluorescencia
cambian según si el antígeno y el
anticuerpo se encuentran libres o
unidos
- Homogéneos
- Necesitan una separación
de las fracciones libre y
ligada del antígeno
marcado. Además, las
propiedades de la
fluorescencia no son
diferentes dependiendo
de si el antígeno se
encuentra unido o no al
anticuerpo
- (FIA) Directo
- El anticuerpo específico
frente al antígeno que se
busca y ambos reaccionan.
Posteriormente se elimina el
exceso del anticuerpo y se
procede a realizar la lectura
- Indirecto
- Permite detectar un
antígeno con un
anticuerpo no conjugado
con fluorocromo y es una
de las técnicas indirectas
que son comúnmente
empleadas en
laboratorio clínico
- Permite detectar un
antígeno con un
anticuerpo no conjugado
con fluorocromo y es una
de las técnicas indirectas
que son comúnmente
empleadas en
laboratorio clínico
- Indirecto
- El anticuerpo específico
frente al antígeno que se
busca y ambos reaccionan.
Posteriormente se elimina el
exceso del anticuerpo y se
procede a realizar la lectura
- (FIA) Heterogéneos
- Se basa en el uso de colorantes o moléculas fluorescentes que deben ser
estables para marcar inmunocomplejos y no interferir en la formación del
complejo antígeno anticuerpo. Los fluorocromos más utilizados son la
rodamina y la fluoresceína, que son capaces de absorber energía a una
longitud de onda
- Electroquimioluminiscencia
(ECLIA)
- Es altamente recomendable en
el tamizaje serológico por los
altos valores de sensibilidad y
especificidad, su completa
automatización, no genera un
desperdicio de
hemocomponentes.
- Es altamente recomendable en
el tamizaje serológico por los
altos valores de sensibilidad y
especificidad, su completa
automatización, no genera un
desperdicio de
hemocomponentes.
- Radioinmunoensayo (RIA)
- Por la técnica de
medición
- Tipos
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