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Description
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NMX-AA-028-1981
- INTRODUCCIÓN
- Demanda bioquímica de oxígeno (DBO5): Es una estimación de la cantidad de oxígeno que requiere una población microbiana
heterogénea para oxidar la materia orgánica de una muestra de agua en un periodo de 5 días. El método se basa en medir el
oxígeno consumido por una población microbiana en condiciones en las que se ha inhibido los procesos fotosintéticos de
producción de oxígeno en condiciones que favorecen el desarrollo de los microorganismos.
- Demanda bioquímica de oxígeno (DBO5): Es una estimación de la cantidad de oxígeno que requiere una población microbiana
heterogénea para oxidar la materia orgánica de una muestra de agua en un periodo de 5 días. El método se basa en medir el
oxígeno consumido por una población microbiana en condiciones en las que se ha inhibido los procesos fotosintéticos de
producción de oxígeno en condiciones que favorecen el desarrollo de los microorganismos.
- OBJETIVO Y CAMPO
DE APLICACIÓN
- Esta norma mexicana establece el método de
análisis para la determinación de la demanda
bioquímica de oxígeno (DBO5) en aguas
naturales, residuales y residuales tratadas.
- NOTA. Se determina la
cantidad de oxígeno
utilizada por una población
microbiana heterogénea
para transformar la
materia orgánica, en un
periodo de incubación de 5
días a 20ºC.
- NOTA. Se determina la
cantidad de oxígeno
utilizada por una población
microbiana heterogénea
para transformar la
materia orgánica, en un
periodo de incubación de 5
días a 20ºC.
- Esta norma mexicana establece el método de
análisis para la determinación de la demanda
bioquímica de oxígeno (DBO5) en aguas
naturales, residuales y residuales tratadas.
- PRINCIPIO DEL
MÉTODO
- El método se basa en medir la cantidad de
oxígeno que requieren los microorganismos
para efectuar la oxidación de la materia
orgánica presente en aguas naturales y
residuales y se determina por la diferencia entre
el oxígeno disuelto inicial y el oxígeno disuelto
al cabo de cinco días de incubación a 20°C. Para
la determinación de oxígeno disuelto (OD) se
puede emplear cualquiera de los dos métodos
establecidos en la norma mexicana
NMX-AA-012-SCFI (ver 2 Referencias).
- El método se basa en medir la cantidad de
oxígeno que requieren los microorganismos
para efectuar la oxidación de la materia
orgánica presente en aguas naturales y
residuales y se determina por la diferencia entre
el oxígeno disuelto inicial y el oxígeno disuelto
al cabo de cinco días de incubación a 20°C. Para
la determinación de oxígeno disuelto (OD) se
puede emplear cualquiera de los dos métodos
establecidos en la norma mexicana
NMX-AA-012-SCFI (ver 2 Referencias).
- REACTIVOS Y
PATRONES
- Todos los productos químicos usados en este método deben ser grado reactivo, a menos que se
indique otro grado. Agua: Debe entenderse agua que cumpla con las siguientes características: a)
Resistividad, megohm-cm a 25ºC: 0,2 min.; b) Conductividad, µS/cm a 25ºC: 5,0 máx., y c) pH: 5,0 a 8,0.
- Fosfato monobásico de potasio (KH2PO4) Fosfato dibásico de potasio (K2HPO4)
Fosfato dibásico de sodio heptahidratado (Na2HPO4•7H2O) Cloruro de amonio
(NH4Cl) Sulfato de magnesio heptahidratado (MgSO4•7H2O) Cloruro de calcio
anhidro (CaCl2) Cloruro férrico hexahidratado (FeCl3•6H2O) Ácido sulfúrico
concentrado (H2SO4) Hidróxido de sodio (NaOH) Sulfito de sodio (Na2SO3)
2-cloro-6 (triclorometil) piridina Glucosa grado patrón primario (C6H12O6)
Ácido glutámico grado patrón primario(C5H9NO4) Ácido clorhídrico (HCl) Acido
nítrico (HNO3)
- Fosfato monobásico de potasio (KH2PO4) Fosfato dibásico de potasio (K2HPO4)
Fosfato dibásico de sodio heptahidratado (Na2HPO4•7H2O) Cloruro de amonio
(NH4Cl) Sulfato de magnesio heptahidratado (MgSO4•7H2O) Cloruro de calcio
anhidro (CaCl2) Cloruro férrico hexahidratado (FeCl3•6H2O) Ácido sulfúrico
concentrado (H2SO4) Hidróxido de sodio (NaOH) Sulfito de sodio (Na2SO3)
2-cloro-6 (triclorometil) piridina Glucosa grado patrón primario (C6H12O6)
Ácido glutámico grado patrón primario(C5H9NO4) Ácido clorhídrico (HCl) Acido
nítrico (HNO3)
- Todos los productos químicos usados en este método deben ser grado reactivo, a menos que se
indique otro grado. Agua: Debe entenderse agua que cumpla con las siguientes características: a)
Resistividad, megohm-cm a 25ºC: 0,2 min.; b) Conductividad, µS/cm a 25ºC: 5,0 máx., y c) pH: 5,0 a 8,0.
- RECOLECCIÓN, PRESERVACIÓN Y
ALMACENAMIENTO DE MUESTRAS
- En el caso de aguas naturales debe tomarse un
mínimo de 1 L de muestra en un envase de
polietileno o vidrio. En el caso de aguas residuales
(DBO5 mayores a 50 mg/L) deben tomarse mínimo
100 mL. Pueden utilizarse muestras simples o
compuestas. No se debe agregar ningún
preservador a las muestras. Solo deben conservarse
a 4ºC hasta su análisis. El tiempo máximo de
almacenamiento previo al análisis es de 24 h.
- En el caso de aguas naturales debe tomarse un
mínimo de 1 L de muestra en un envase de
polietileno o vidrio. En el caso de aguas residuales
(DBO5 mayores a 50 mg/L) deben tomarse mínimo
100 mL. Pueden utilizarse muestras simples o
compuestas. No se debe agregar ningún
preservador a las muestras. Solo deben conservarse
a 4ºC hasta su análisis. El tiempo máximo de
almacenamiento previo al análisis es de 24 h.
- EQUIPO Y MATERIALES
- Equipo de aireación con difusor Incubador: Controlado por termostato a 20ºC ± 1ºC. Eliminar
toda la luz para evitar la posibilidad de producción fotosintética de oxígeno disuelto. Balanza
analítica con precisión de 0,1 mg Medidor de oxígeno disuelto Material Limpieza del material.
Todo el material usado en la determinación debe ser exclusivo para este procedimiento. Para el
lavado del material remojar durante 1 h en una NMX-AA-028-SCFI-2001 9/20 SECRETARÍA DE
ECONOMÍA DGN disolución de ácido sulfúrico al 10 % y enjuagar con agua. Los detergentes con
base de amoniaco no deben usarse para la limpieza del material. Los contenedores de las
muestras deben lavarse con disolución de detergente no iónico, libre de metales, enjuagarse con
agua, remojarse en ácido toda la noche y volver a enjuagarse con agua libre de metales.Para el
material de cuarzo, politetrafloroetileno o material de vidrio debe dejarse remojando de 12 h a
24 h con HNO3 (1:1), HCl (1
- Equipo de aireación con difusor Incubador: Controlado por termostato a 20ºC ± 1ºC. Eliminar
toda la luz para evitar la posibilidad de producción fotosintética de oxígeno disuelto. Balanza
analítica con precisión de 0,1 mg Medidor de oxígeno disuelto Material Limpieza del material.
Todo el material usado en la determinación debe ser exclusivo para este procedimiento. Para el
lavado del material remojar durante 1 h en una NMX-AA-028-SCFI-2001 9/20 SECRETARÍA DE
ECONOMÍA DGN disolución de ácido sulfúrico al 10 % y enjuagar con agua. Los detergentes con
base de amoniaco no deben usarse para la limpieza del material. Los contenedores de las
muestras deben lavarse con disolución de detergente no iónico, libre de metales, enjuagarse con
agua, remojarse en ácido toda la noche y volver a enjuagarse con agua libre de metales.Para el
material de cuarzo, politetrafloroetileno o material de vidrio debe dejarse remojando de 12 h a
24 h con HNO3 (1:1), HCl (1
- CONTROL DE CALIDAD
- Cada laboratorio que utilice este método debe operar un
programa de control de calidad (CC) formal.
NMX-AA-028-SCFI-2001 10/20 SECRETARÍA DE ECONOMÍA
DGN El laboratorio debe mantener los siguientes
registros: - Los nombres y títulos de los analistas que
ejecutaron los análisis y el encargado de control de
calidad que verifica los análisis, y - Las bitácoras
manuscritas del analista y del equipo en los que se
contengan los siguientes datos: a) Identificación de la
muestra; b) Fecha del análisis; c) Procedimiento
cronológico utilizado; d) Cantidad de muestra utilizada; e)
Número de muestras de control de calidad analizadas; f)
Trazabilidad de las calibraciones de los instrumentos de
medición; g) Evidencia de la aceptación o rechazo de los
resultados, y h) Además el laboratorio debe mantener la
información original reportada por los equipos en
disquetes o en otros respaldos de información. De tal
forma que permita a un evaluador externo reconstruir
cada determinación mediante el segu
- Cada laboratorio que utilice este método debe operar un
programa de control de calidad (CC) formal.
NMX-AA-028-SCFI-2001 10/20 SECRETARÍA DE ECONOMÍA
DGN El laboratorio debe mantener los siguientes
registros: - Los nombres y títulos de los analistas que
ejecutaron los análisis y el encargado de control de
calidad que verifica los análisis, y - Las bitácoras
manuscritas del analista y del equipo en los que se
contengan los siguientes datos: a) Identificación de la
muestra; b) Fecha del análisis; c) Procedimiento
cronológico utilizado; d) Cantidad de muestra utilizada; e)
Número de muestras de control de calidad analizadas; f)
Trazabilidad de las calibraciones de los instrumentos de
medición; g) Evidencia de la aceptación o rechazo de los
resultados, y h) Además el laboratorio debe mantener la
información original reportada por los equipos en
disquetes o en otros respaldos de información. De tal
forma que permita a un evaluador externo reconstruir
cada determinación mediante el segu
- PROCEDIMIENTO
- Preparación de agua para dilución NMX-AA-028-SCFI-2001 11/20 SECRETARÍA DE ECONOMÍA DGN
Colocar el volumen requerido de agua en un frasco y añadir por cada litro de agua 1 mL de cada una
de las siguientes disoluciones: disolución de sulfato de magnesio (ver inciso 5.17), disolución de
cloruro de calcio (ver inciso 5.18), disolución de cloruro férrico (ver inciso 5.19) y disolución
amortiguadora de fosfatos (ver inciso 5.16). Preparar el agua de dilución diariamente. Analizar y
almacenar el agua de dilución como se describe en los incisos 10.2 y 10.3, de tal forma que siempre
tenga a mano agua de calidad garantizada. Antes de usar el agua de dilución debe ponerse a una
temperatura aproximada de 20ºC. Saturar con oxígeno aireando con aire filtrado, libre de materia
orgánica durante 1 h por lo menos. Si la muestra presenta alto contenido de biocidas como cloro o se
sabe de su bajo contenido de materia orgánica, es necesario inocular la muestra. Si se requiere,
sembrar el agua de dilución
- Control del agua de dilución 10.2.1 Utilizar este procedimiento como una comprobación aproximada
de la calidad del agua de dilución. Si la disminución de oxígeno disuelto del agua excede de 0,2 mg/L,
obtener agua de mejor calidad mejorando la purificación o usar agua de otra fuente.
Alternativamente si se requiere inhibir la nitrificación, almacenar el agua de dilución sembrada en
una habitación oscura a temperatura ambiente hasta que la captación de oxígeno disuelto se haya
reducido lo suficiente para cumplir los criterios de comprobación del agua de dilución. No se
recomienda su almacenamiento cuando la DBO5 se va a determinar sin inhibir la nitrificación ya que
pueden desarrollarse microorganismos nitrificantes durante ese tiempo. Si el agua de dilución no ha
sido almacenada para mejorar su calidad, añadir suficiente inóculo como para un consumo de OD de
0,05 mg/L a 0,1 mg/L en cinco días a 20°C. Al Incubar en un frasco Winkler lleno de agua de dilución
durante cinco días a 20°C, el
- Control de la glucosa-ácido glutámico Comprobar en cada lote analítico la calidad del agua de dilución, la
efectividad del inóculo y la técnica analítica mediante determinaciones de la DBO5 en muestras estándar
de concentración conocida. Utilizar la disolución de glucosa-ácido glutámico (ver inciso 5.23) como
disolución madre de control. La glucosa tiene una tasa excepcionalmente alta y variable de oxidación,
pero cuando se utiliza con ácido glutámico, dicha tasa se estabiliza y es similar a la obtenida en muchas
aguas residuales municipales. Alternativamente, si un agua residual particular contiene un componente
principal identificable que contribuya a la DBO5, utilizar este compuesto en lugar de la glucosa-ácido
glutámico. Determinar la DBO5 de una disolución al 2 % de la disolución de control patrón de
glucosa-ácido glutámico utilizando las técnicas NMX-AA-028-SCFI-2001 12/20 SECRETARÍA DE ECONOMÍA
DGN expuestas en los incisos 10.4 a 10.10.
- Inóculo 10.4.1 Fuente de la siembra 10.4.1.1 Es necesario contar con una población de
microorganismos capaces de oxidar la materia orgánica biodegradable de la muestra. El agua
residual doméstica, los efluentes no clorados o sin desinfección, los efluentes de las plantas de
tratamiento de desechos biológicos y las aguas superficiales que reciben las descargas de aguas
residuales que contienen poblaciones microbianas satisfactorias. Algunas muestras no contienen
una población microbiana suficiente (por ejemplo, algunos residuos industriales no tratados,
residuos desinfectados, residuos de alta temperatura o con valores de pH extremos). Para tales
residuos, sembrar el agua de dilución añadiendo una población de microorganismos. La mejor
siembra es la que proviene del efluente de un sistema de tratamiento biológico de aguas residuales.
Cuando se usa como siembra el efluente de tratamiento biológico de sistema de aguas residuales se
recomienda la inhibición de la nitrificación. Cuando no s
- Preparación de agua para dilución NMX-AA-028-SCFI-2001 11/20 SECRETARÍA DE ECONOMÍA DGN
Colocar el volumen requerido de agua en un frasco y añadir por cada litro de agua 1 mL de cada una
de las siguientes disoluciones: disolución de sulfato de magnesio (ver inciso 5.17), disolución de
cloruro de calcio (ver inciso 5.18), disolución de cloruro férrico (ver inciso 5.19) y disolución
amortiguadora de fosfatos (ver inciso 5.16). Preparar el agua de dilución diariamente. Analizar y
almacenar el agua de dilución como se describe en los incisos 10.2 y 10.3, de tal forma que siempre
tenga a mano agua de calidad garantizada. Antes de usar el agua de dilución debe ponerse a una
temperatura aproximada de 20ºC. Saturar con oxígeno aireando con aire filtrado, libre de materia
orgánica durante 1 h por lo menos. Si la muestra presenta alto contenido de biocidas como cloro o se
sabe de su bajo contenido de materia orgánica, es necesario inocular la muestra. Si se requiere,
sembrar el agua de dilución
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