Reação em Cadeia da Polimerase (PCR)

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Reação em Cadeia da Polimerase (PCR)
  1. Técnica que tem a capacidade de ampliar, fazendo cópias de um ou mais fragmentos especificos de DNA
    1. Termociclador
      1. Ciclos da PCR:
        1. Variações da Técnica:
          1. PCR Convencional
            1. Método usado para multiplicar um trecho específico do DNA, até que a sua concentração seja amplificada e possa ser detectada.
              1. Deve conter na reação: DNA polimerase, íons de Mg²+ e desoxiribonucleptídeos (ATP, TTP, CTP e GTP)
              2. Usada a nível qualitativo
                1. Usa a TaqPolimerase que é uma enzima que age no material genético de DNA
                2. RFLP
                  1. Engloba duas técnicas, realizada em duas etapas
                    1. 1°: PCR Convencional
                      1. 2°: Digestão
                      2. Usa uma enzima de restrição
                        1. Qualitativa
                          1. PCR Reação em Cadeia da Polimerase seguido de Técnica do Polimorfismo do Comprimento de Fragmentos de Restrição
                          2. RT-PCR
                            1. Técnica de transcrição reversa e amplificação que é usada para avaliar a expressão gênica a partir do mRNA.
                              1. RT: Transcriptase Reversa
                                1. Enzima que transcreve o material genético de RNA para DNA ou de DNA para RNA
                                2. Verifica apenas RNA
                                  1. Qualitativa
                                    1. Técnica ultilizada para patógenos de RNA como, HIV, hepatite C e Sarc-Cov-2
                                      1. É realizado em duas etapas
                                        1. Construção do cDNA (DNA complementar)
                                          1. Usando a Transcriptase Reversa
                                          2. Amplificação do cDNA
                                            1. Utilizando a TaqPolimerase
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