Métodos Gerais de Estudo

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Fisioterpia-104 Alunas: Laura Renata Monteiro Leão Maria Clara Falcão Rodrigues Sampaio Michele Rouse Fabrício do Nascimento
Maria Clara Sampaio
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Resumen del Recurso

Pregunta Respuesta
Métodos Gerais de Estudos Métodos e técnicas utilizadas no processo de obtenção da preparação histológica
Preparação histológica (conceito) Material formado por uma lâmina de vidro e uma lamínula (de espessura nunca maior que 0.17 mm) que abrigam no meio uma fina camada de matéria orgânica
Preparação histológica (classificações) -Permanente ou mediato -A fresco ou imediato
Mediato e Imediato -A preparação histológica do tipo mediata/permanente apresenta a vantagem de ter seu tempo de vida útil mais longo em relação à imediata/fresco, cuja vida útil é mais limitada
Elaboração do plano de trabalho (etapas) -Escolha do animal respeitando a fauna -Coleta de peças necessárias -Execução das etapas de processamento histológico -Listagem do material cirúrgico e reagentes
Processamento histológico (etapas) 1.Coleta do material 2.Fixação 3.Desmineralização 4.Desidratação 5.Diafanização 6.Impregnação por parafina 7.Inclusão definitiva 8.Toalete do bloco 9.Microtomia 10.Coleta do corte 11.Desparafinização 12.Hidratação 13.Coloração 14.Repetição das etapas 4 e 5 15.Montagem final
Coleta do material (etapas) 1.Aplicação da anestesia no animal 2.Retirada da peça anatômica 3.Lavagem da peça
Fixação -Imersão da peça anatômica em um líquido fixador para proteção e preservação do material como se “in vivo”
Desmineralização/ Descalcificação -Retirada de sais minerais da peça anatômica, pois estragam a navalha do micrótomo -Ocorre apenas em peças histológicas com concentração de sais
Desidratação -Lavagem da peça seguida de imersão em bateria crescente de álcool
Diafanização -Imersão em agente diafanizante (geralmente xilol) para retirada do álcool impregnado à peça
Impregnação/ Embebição por parafina -Imersão do material em parafina líquida em uma estufa apropriada -Também pode ser utilizado gelatina ou resina
Inclusão definitiva -Despejo da parafina líquida junto à peça anatômica em um molde apropriado -Solidificação da parafina à temperatura ambiente
Toalete de bloco -Aparamento do excesso de parafina seguido da fixação do bloco parafina-material a um suporte de madeira
Microtomia -Corte do bloco em fatias finas pelo aparelho micrótomo, obtendo-se cortes laminados do material anatômico -Banho em água quente para estiramento das fatias
Coleta de cortes -Retirada das fatias do banho-maria e colagem em lâminas de vidro
Desparafinização -Retirada da parafina impregnada à peça por banho em xilol
Hidratação -Imersão em bateria decrescente de álcool para retirada de xilol impregnado à peça, seguido de imersão em água destilada
Coloração (etapas) 1.Adição de corante hematoxilina 2.Lavagem em água corrente e água destilada 3.Adição de corante eosina 4.Lavagem novamente em água destilada
Corantes -Hematoxilina (corante básico) -Eosina (corante ácido) -Coloração ortocromática é aquela em que o tecido exibe a mesma cor do corante -Metacromática é aquela em que o tecido exibe cor diferente do corante
Montagem final (etapas) 1.Faz-se novamente desidratação e diafanização 2.Colagem da peça entre uma lamínula e lâmina de vidro 3.Uso do bálsamo do Canadá como cola 4.Preparação histológica finalizada
Processamento histológico (tipos) -Esmagamento -Dacalque/Imprint -Espalhamento -Esfregaço de sangue -Montagem total
Esmagamento 1.Coloca-se um pequeno fragmento do tecido entre a lâmina preparada e a lamínula 2.Faz-se uma pequena pressão com o polegar. -Método usado em casos de aderência baixa entre as células do tecido.
Esmagamento (foto)
Decalque/Imprint 1.Retirada de um um fragmento do órgão do animal 2.Lavagem para retirada do sangue restante 3.Pressiona-se o material sobre uma lâmina de vidro. -Obtêm-se um "carimbo" do núcleo celular, permitindo a identificação do DNA e de algumas células.
Decalque/Imprint (foto)
Espalhamento 1.Raspagem da superfície de membranas mucosas 2.Espalhamento do material sobre uma lâmina de vidro. -Obtêm-se células espalhadas e pouco íntegras.
Espalhamento (foto)
Esfregaço de sangue 1.Depósito de uma gota de sangue sobre uma lâmina 2.Com uma segunda lâmina à 45° desliza-se sobre a primeira -Obtêm-se células isoladas e uma preparação histológica fina
Esfregaço de sangue (foto)
Montagem total -Método que se baseia em coletar um material fino ou transparente o suficiente para que possa ser estudado no microscópio óptico -Obtêm-se células inteiras
Montagem total (foto)
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