3.2 INCLUSION DE TEJIDOS EN PARAFINA

Para la inclusión de muestras que han de observarse con el microscopio óptico se utiliza sobre todo la parafina, y en menor medida la celoidina, como medio de inclusión.
1. La parafina es una sustancia de aspecto ceroso que está formada por mezclas de hidrocarburos saturados
  1. Las parafinas más usadas tienen un punto de fusión en torno a los 60 °C. Podemos también modificar las características de las parafinas añadiendo sustancias para variar su dureza, viscosidad, fragilidad
Vamos a describir los pasos para la inclusión en parafina de muestras de tejido previamente fijadas.
1. A temperatura ambiente es sólida y su punto de fusión puede variar entre 40 °C y 70 °C según la composición de la mezcla de hidrocarburos
  1. La parafina no es miscible con agua, mientras que todos los tejidos están formados principalmente por agua. Además, la mayoría de los fijadores son soluciones acuosas.
3.2.1 ORIENTACION DE TEJIDOS
1. La calidad y la utilidad final de una sección de tejido depende de la ejecución impecable de cada uno de los pasos del procesamiento; cada paso, a su vez, dependerá completamente del paso anterior si se desea calidad óptima
2. . El técnico de histopatología debe escrudiñar cada uno de los fragmentos del tejido recibido, analizar su estructura, y decidir cómo situar el tejido en el bloque.
3. Consideraciones generales:
  1. Las secciones de tejidos son incluidas perfectamente planas para asegurarse de que se obtenga una sección completa.
  2. Debe tenerse mucho cuidado para que después no aparezcan artefactos causados por un manejo inadecuado de las muestras de tejido
  3. Estructuras tubulares tales como vaso deferente, venas, arterias y oviductos deben ser incluidas en una forma tal que la cuchilla corte a través de la luz tubular.
  4. Superficies Epiteliales Aquellos tejidos que tienen una superficie epitelial, con la piel, el intestino, la vesícula biliar, la vejiga urinaria y el útero, deben ser colocados de forma tal que el plano de sección pase a través de todas las capas del tejido.
  5. Los especímenes, cuando son múltiples deben ser incluidos uno junto al otro con sus superficies epiteliales orientadas en la misma dirección.
  6. Especímenes Grandes y Sólidos Los especímenes rectangulares grandes o sólidos como el útero, la próstata, la glándula tiroides y el tejido óseo deben ser incluidos con un ligero ángulo en relación al borde de la cuchilla.
  7. Múltiples Especímenes Múltiples fragmentos de tejido blando y ganglios linfáticos deben ser colocados uno junto al otro con suficiente espacio entre ellos silos tejidos se colocan uno encima del otro, existe la posibilidad de que el tejido de abajo distorsione el tejido que está encima
  8. Estructuras Quísticas Después de la bisección, los quistes pequeños adoptan una forma de cúpula. Por lo tanto, los quistes deben ser incluidos con la superficie de corte hacia abajo
3.2.2 HISTOCENTRO PARTES COMPONENTES
1. Especificación de instrumento• Depósito de parafina de tres litros de capacidad.• Activación del flujo de parafina mediante abrazadera de altura ajustable, pivotante; activación manual mediante el molde de inclusión o mediante un interruptor
2. Recipientes colectores de parafina extraíbles, calefactables (de forma indirecta a través de la superficie de trabajo)
3. Superficie de trabajo calefactable, grande y de fácil limpieza con zona de refrigeración integrada también para cajas para accesorios extragrandes
4. Depósitos para cajas para accesorios y/o moldes de inclusión con tapa deslizante, extraíbles e intercambiables
5. Iluminación de la superficie de trabajo óptima gracias a la lámpara de LED ajustable individualmente.•
7. Temperatura del depósito de cajas para accesorios y moldes de inclusión, de la superficie de trabajo y del depósito de parafina regulable entre 55 °C y 70 °C
8. Indicación de temperatura permanente de todas las superficies de trabajo
9. Se puede programar la hora de comienzo y fin de trabajo, así como los días de trabajo.
10. Mesa de laboratorio estable, sin vibraciones con placa de platina horizontal y plana, así como base amplia también sin vibraciones
11. .• Las zonas cercanas al lugar de trabajo han de estar exentas de aceite y vapores químicos
3.2.3 FORMACION DEL BLOQUE DE PARAFINA
1. La parafina es una sustancia de aspecto ceroso que está formada por mezclas de hidrocarburos saturados.
2. A temperatura ambiente es sólida y su punto de fusión puede variar entre 40 °C y 70 °C según la composición de la mezcla de hidrocarburos
3. . Las parafinas más usadas tienen un punto de fusión en torno a los 60 °C. Podemos también modificar las características de las parafinas añadiendo sustancias para variar su dureza, viscosidad, fragilidad,
4. Por último se pasa el tejido a parafina previamente licuada en una estufa regulada a la temperatura apropiada para dicho tipo de parafina
5. El tiempo que dura dichos pasos depende de lo volátil que sea el líquido intermediario y lo grande que sea nuestra pieza. Será mayor cuanto menos volátil es el líquido intermediario o mayor sea la muestra de tejido. Hay que tener en cuenta que un tiempo excesivo en parafina puede endurecer el tejido
6. Tras el embebimiento completo de la muestra se vierte parafina líquida en un molde, se introduce la muestra y se coloca según la orientación deseada de corte y se deja solidificar a temperatura ambiente
7. La inclusión es el proceso por el cual se incrementará la dureza y consistencia de la pieza para permitir su corte. Esto se consigue incluyendo la pieza en una sustancia que tenga la dureza y consistencia adecuada
8. La parafina es una sustancia que por encima de los 600C es líquida y solidifica por debajo de esta temperatura, esto facilita de difusión de la parafina por los tejidos cuando está líquida

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