SUSTANCIAS ALTERNATIVAS: FIJACIÓN

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SUSTANCIAS ALTERNATIVAS: FIJACIÓN
  1. Fijadores Simples
    1. Etanol, metanol, acetona: fijan por deshidratación y coagulación de las proteínas, sobre todo las citosólicas, extraen los lípidos pero no afectan a los carbohidratos. Son buenos fijadores en muestras pequeñas, preservan el glucógeno, los pigmentos, y proteínas como las enzimas.Sirve como conservante de muestras y pueden producir endurecimiento y retracción del tejido.
      1. Ácido acético: su estado de fijación consiste en cambiar el estado coliodal de las proteínas, se lo utiliza a una concentración que varía entre 1-5 %. Es el fijador ideal para ácidos nucleicos y nucleoproteínas. Su desventaja es que destruye las mitocondrias y tiene un efecto de mala fijación de membrana y citoplasma.
        1. Ácido pícrico: estas sales de origen picrato coagulan las proteínas de los tejidos. Preservan bien la estructura celular, no produce retraccion cuando el tiempo de fijación es óptimo, preserva bien el glucógeno y lípidos. Es un buen fijador para tinciones generales puesto que tiene efecto mordiente y favorece la unión de los colorantes.
          1. Glutaraldehído: muy común, esta en solución polimeriza formando dímeros y trímeros, tiene poca velocidad de penetración, forma puentes entre las moléculas de los tejidos. Tiene una alta capacidad àra preservar las estructuras celulares, puesto que es capaz de entrelazar el tejido más fuertemente que otros tejidos en aldehídos, por lo que es el fijador de referencia para la observación ultraestructural de las células con el microscopio electrónico.
            1. TETRAÓXIDO DE OSMIO: tiene poca penetración en los bloques de tejido entre 0.5 - 1 mm, y se puede usar tanto en solución como un vapor. Forma puentes entre los enlaces de las cadenas de los ácidos grasos de los lípidos de las membranas celulares, a las que hace insolubles, oscuras y opacas a los electrones.
            2. Mezclas Fijadoras
              1. Líquido de Bouin: formado por ácido pícrico, formaldehido y ácido acético glacial; es una solución muy utilizada para el procesamiento de tejidos que se incluirán en parafina y a cuyas secciones ser les puede aplicar un amplio espectro de tinciones. En el caso de la fijación por inmersión no exceder el tiempo de fijación de 48 horas.
                1. Líquido de Clarke: formado por etanol y ácido acético glacial. Es uno de los primeros fijadores que se empleó para muestras que se incluían en parafina.
                  1. Carnoy: buen fijador para el glucógeno, para los hidratos de carbono simples y para las proteínas fibrosas. Es bueno para observar los ácidos nucleícos, aunque no su morfología nuclear. Puede producir retracción tisular. Está formado por etanol absoluto 60%, cloroformo 30% y ácido acético glacial 10 %.
                    1. Glutaraldehído-tetróxido de osmio: es habitual en tejidos destinados a microscopía electrónica seasn esencialmente fijados en glutaraldehído (1-3%) y parafina (2-4%), para posteriormente ser postfijados en tetróxido de osmio al 1 % en solución tamponada.
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