PROCESAMIENTO DE TEJIDOS

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PROCESAMIENTO DE TEJIDOS
  1. Es un conjunto de pasos a seguir para la obtención de preparados histológicos aptos para su estudio mediante el microscopio óptico.
    1. Obtención del material
      1. Biopsia: consiste en tomar un trozo de tejido de un ser vivo.
        1. Necropsia: es el procedimiento en el cual se extrae material de un cadáver
          1. Autopsia: consiste en el estudio analítico y sistemático completo. macroscópico y microscópico de los órganos, aparatos y sistemas de un cadáver. Se realiza para establecer causas de muerte
        2. Fijación: una vez obtenido el material que se desea estudiar por cualquiera de los procedimientos descriptos se procede a su fijación con lo que se evita la destrucción o lisis celular. Es un proceso físico — químico complejo por el cual se mantiene a las estructuras orgánicas en el estado más parecido al que poseían en vida.
          1. Deshidratación: se coloca la muestra en alcoholes de concentración creciente para eliminar el agua que contenga ya que la parafina no es miscible con agua. Se utiliza etanol 70%, 80%, 96% y 100%.
            1. Aclaración: son solventes que producen transparencia en los tejidos, además de solubilizar la parafina. Entre ellos se encuentran. xilol. toluol. acetona, benceno. El más usado es el Xilol.
              1. Inclusión en parafina: la parafina es una mezcla de hidrocarburos saturados que tienen diferentes puntos de fusión. Parafina blanda funde a 44 – 48ºC y la parafina dura a 56 – 58ºC. LA parafina se pone en estufa de cultivo a unos grados por encima de su punto de fusión. Se sumerge la muestra,
                1. Preparación del taco: se corta un trozo de parafina que contiene la muestra en forma de pirámide truncada, de manera tal que la misma quede sobre la base menor
                  1. Corte: se realiza mediante el uso del micrótomo. El micrótomo de congelación permite cortar el tejido después de fijarlo por frío, congela con dióxido de carbono y lo endurece para que luego pueda ser cortado
                    1. Colocación sobre portaobjeto: efectuados los cortes se colocan en agua tibia para que se extiendan y luego se recogen con un pincel y se los extienden en el portaobjetos y se dejan secar para su posterior coloración
                      1. Desparafinización: se debe extraer todo la parafina del tejido y aclararlo nuevamente. Se utiliza Xilol.
                        1. Hidratación: se debe hidratar el tejido ya que la mayoría de los colorantes son de base acuosa. Para ello se coloca el portaobjeto en soluciones de etanol de concentraciones decrecientes. Etanol 100%, 96%, 80%, 70% y Agua destilada
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