19996544
Description
Mind Map by Laura Camila Mayorga Lozada, updated more than 1 year ago
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Created by Laura Camila Mayorga Lozada
about 5 years ago
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Funcionamiento del sistema
CRISPR/Cas – edición de genomas
- Pimera
etapa
- Adquisición de secuencias espaciadoras
tras la exposición al patógeno.
- Las secuencias se
ubican en el citoplasma
- Célula reconoce a
PAM
- Célula incorpora a PAM
nucleótidos adyacentes como
nueva secuencia espaciadora
- Genera copia de la
secuencia repetida.
- Flanquea la espaciadora
por ambos lados.
- Flanquea la espaciadora
por ambos lados.
- Genera copia de la
secuencia repetida.
- Las secuencias se
ubican en el citoplasma
- Adquisición de secuencias espaciadoras
tras la exposición al patógeno.
- Segunda
etapa.
- Se transcribe el ARNcr
- CRISPR I
- Activa a Cas 3
- Activa a Cas 3
- CRISPR II
- Activa a Cas
9
- Se requiere tracrARN
- Segundo ARN
codificante
- Complementario a secuencia
palindrómic a repetida
- Forma dímero con
secuencias repetidas
- Al finalizar la transcripción.
- Al finalizar la transcripción.
- Segundo ARN
codificante
- RNASA iii reconoce
ARNcr/tracrARN.
- Lo procesa para generar
transcrito maduro.
- Lo procesa para generar
transcrito maduro.
- Se requiere tracrARN
- Activa a Cas
9
- CRISPR III
- Activa a Cas
6
- Activa a Cas
6
- CRISPR I
- Se transcribe el ARNcr
- Tercera
etapa
- Cas se asocia con ARNcr
maduro
- Forma complejo
CRISPR/Cas.
- Forma complejo
CRISPR/Cas.
- ARNcr guía al complejo
hacia su blnco.
- Por medio de reconocimiento
se secuencia complementaria.
- Por medio de reconocimiento
se secuencia complementaria.
- En caso de segunda infección
- Secuencia espaciadora de ARNcr
maduro reconoce y forma complejo
ADN-ARN con el material exógeno.
- Reconocido por los dominios
de Cas: RUVc y HNH.
- Cada uno corta una hebra
distinta. (DSB)
- Puede ser reparado
de dos maneras:
- Homóloga
(HDR)
- Requiere introducción de secuencia con
alto porcentaje de homología en 5' y 3'.
- Requiere introducción de secuencia con
alto porcentaje de homología en 5' y 3'.
- No homóloga
(NHEJ)
- Puede resultar en inserciones
o deleciones no deseadas.
- Puede resultar en inserciones
o deleciones no deseadas.
- Homóloga
(HDR)
- Puede ser reparado
de dos maneras:
- Cada uno corta una hebra
distinta. (DSB)
- Reconocido por los dominios
de Cas: RUVc y HNH.
- Secuencia espaciadora de ARNcr
maduro reconoce y forma complejo
ADN-ARN con el material exógeno.
- Cas se asocia con ARNcr
maduro
- Utilidad en edición de genomas
- Inserción de genes por recombinación homóloga
- CRISPR/Cas se dirige contra una secuencia específica
- Induce corte en ambas cadenas.
- Puede dirigirse a un
locus e inducir HDR.
- Es capaz de trabaja en
simultaneo con varios genes.
- Induce corte en ambas cadenas.
- CRISPR/Cas se dirige contra una secuencia específica
- Delección dentro del genoma
- Gracias a actividad endonucleasa de Cas.
- Se emplea para generar deleciones de
fragmentos grandes de ADN
- No hay correlación entre el tamaño y
la frecuencia de deleciones.
- Gracias a actividad endonucleasa de Cas.
- Mutagénesis
- Detección y generación de
mutaciones específicas.
- Mediante inserción de ARNg para varias
secuencias específicas se induce mutagénesis.
- Detección y generación de
mutaciones específicas.
- Inserción de genes por recombinación homóloga
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