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Description
Mind Map by Marco Rojas, updated more than 1 year ago
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Created by Marco Rojas
over 8 years ago
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COLORANTES, TINCIONES DE RUTINA Y
ESPECIALES EN HISTOQUÍMICA
- La coloración: es el proceso mediante el
cual un cuerpo es teñido por una
sustancia colorante, sin perder el color
cuando es lavado con el disolvente
utilizado al preparar la solución colorante.
Con el fin de localizar y determinar ciertas
sustancias o elementos que se encuentren
presentes en el tejido tiñéndole de un
color característico para su identificación.
- proceso mediante el cual un cuerpo es tenido por
una sustancia colorante, sin perder el color cuando
es lavado con el disolvente utilizado al preparar la
solución colorante. con el fin de localizar y
determinar de manera científica ciertas sustancias
o elemento presentes en los tejidos dando un
color característico
- CLASIFICACION DE COLORANTES
- Naturales: Son
aquellos extraídos de
plantas, animales y
minerales. Mantienen
sus propiedades
- • Animales: Como el carmín, que se extrae de la
cochinilla. En técnica histológica se utiliza el
carmín de Best para demostrar glucógeno, el
carmín de Mayer para demostrar mucina; las
células fagocíticas se evidencian con el carmín de
litio (colorante vital)
- • Vegetales: Como la hematoxilina, obtenida de la
corteza de un árbol, el “palo de campeche”
(Haematoxilum campechanum), la safranina que
se extrae de una liliacea (pistilos de la flor de
azafran) o la orceína que se obtiene de un liquen
- • Animales: Como el carmín, que se extrae de la
cochinilla. En técnica histológica se utiliza el
carmín de Best para demostrar glucógeno, el
carmín de Mayer para demostrar mucina; las
células fagocíticas se evidencian con el carmín de
litio (colorante vital)
- Artificiales o Sintéticos: Son productos
derivados de la destilación de la hulla o
carbón. Genéricamente se les conoce
como colorantes derivados de la anilina
- • Colorantes ácidos: Son los
que tiñen muy bien
estructuras básicas.
- •Colorantes básicos: Son
los que tiñen muy bien
estructuras acidas.
- • Colorantes neutros: Son
sales con componentes
ácidos y básicos
- • Colorantes ácidos: Son los
que tiñen muy bien
estructuras básicas.
- Indiferentes: No forman sales. Son
compuestos no iónicos incapaces de la
disociación electrolítica. Son insolubles
en agua pero solubles en solventes
orgánicos como el alcohol y también en
las grasas o lípidos y, aunque ellos
poseen color, en realidad estrictamente
hablando no son colorantes
- Basándose en que son solubles en las
grasas, estas sustancias se utilizan para
demostrar la presencia de ellas en
células y tejidos, pues tiñen
selectivamente a los lípidos
- Basándose en que son solubles en las
grasas, estas sustancias se utilizan para
demostrar la presencia de ellas en
células y tejidos, pues tiñen
selectivamente a los lípidos
- Naturales: Son
aquellos extraídos de
plantas, animales y
minerales. Mantienen
sus propiedades
- LAS COLORACIONES PUEDEN SER
- Ortocromática: Es la acción de
tinción que ejerce un colorante al
colorear una determinada estructura
con su propio color. La gran mayoría
de los colorantes producen
coloración ortocromática.
- Metacromatica: Es la tinción en la
cual, un colorante además de ceder su
propio color a una estructura celular o
tisular también tiñe de color distinto a
otras estructuras
- Ortocromática: Es la acción de
tinción que ejerce un colorante al
colorear una determinada estructura
con su propio color. La gran mayoría
de los colorantes producen
coloración ortocromática.
- TINCIONES DE RUTINA
- COLORACION DE
HEMATOXILINA -EOSINA
(H&E)
- a)os núcleos mediante una hematoxilina,
previamente oxidada y transformada en
hemateina a la que se le añade una
sustancia mordiente para formar una laca
(para tal fin se usan sales metálicas de
aluminio, plomo o fierro). Los núcleos se
colorean de azul, azul morado, violeta,
pardo oscuro o negro, dependiendo de los
agentes oxidantes y mordientes que se
utilizaron.
- 1.-Desparafinar é hidratar. 2.-Hematoxilina de
Harris…3-5min. 3.-Lavar en Agua. 4.-Diferenciar
y Virar. 5.-Lavar en Agua. 6.-Eosina…3min.
7.-Lavar en Agua. 8.-Deshidratar, Aclarar y
Montar.
- 1.-Desparafinar é hidratar. 2.-Hematoxilina de
Harris…3-5min. 3.-Lavar en Agua. 4.-Diferenciar
y Virar. 5.-Lavar en Agua. 6.-Eosina…3min.
7.-Lavar en Agua. 8.-Deshidratar, Aclarar y
Montar.
- b) el citoplasma y material extracelular
utilizando la eosina que les confiere
diversos grados de color rosado.
- a)os núcleos mediante una hematoxilina,
previamente oxidada y transformada en
hemateina a la que se le añade una
sustancia mordiente para formar una laca
(para tal fin se usan sales metálicas de
aluminio, plomo o fierro). Los núcleos se
colorean de azul, azul morado, violeta,
pardo oscuro o negro, dependiendo de los
agentes oxidantes y mordientes que se
utilizaron.
- PERIODIC ACID–SCHIFF
(PAS).
- Utiliza PAS, ácido peryódico de
Schiff, es un colorante incoloro pero
que se torna rojo estable al contacto
con los grupos aldehídos.
Demuestra el glucógeno y
mucosustancias neutrales, esboza
las membranas basales, y pone en
evidencia la mayoría de los tipos de
hongos y parásitos
- Utiliza PAS, ácido peryódico de
Schiff, es un colorante incoloro pero
que se torna rojo estable al contacto
con los grupos aldehídos.
Demuestra el glucógeno y
mucosustancias neutrales, esboza
las membranas basales, y pone en
evidencia la mayoría de los tipos de
hongos y parásitos
- COLORACIÓN
CON AZÁN:
- Es una tinción tricrómica en la cual se obtiene
tres colores diferentes: • Azul oscuro en los
núcleos de la célula; • rojo en el músculo,
queratina y citoplasma celular, • azul claro en
el mucinógeno y colágeno, osea en el tejido
conjuntivo
- Es una tinción tricrómica en la cual se obtiene
tres colores diferentes: • Azul oscuro en los
núcleos de la célula; • rojo en el músculo,
queratina y citoplasma celular, • azul claro en
el mucinógeno y colágeno, osea en el tejido
conjuntivo
- COLORACIÓN CON
HEMATOXILINA
FÉRRICA:
- útil para estudiar detalles
celulares finos. Ej. Las fibras
elásticas y las mitocondrias
presentes en el citoplasma de
ciertas células
- útil para estudiar detalles
celulares finos. Ej. Las fibras
elásticas y las mitocondrias
presentes en el citoplasma de
ciertas células
- TRICRÓMICO DE CAJAL
Y GALLEGO:
- implica el uso de tres colorantes.
Para demostración diferencial y
selectiva de las fibras colágenas y
del músculo.
- implica el uso de tres colorantes.
Para demostración diferencial y
selectiva de las fibras colágenas y
del músculo.
- LA ORCEÍNA Y LA
FUCSINA RESORCINA:
- son colorantes para fibras
elásticas. Se observan
entre bordeau y castaño
oscuro.
- son colorantes para fibras
elásticas. Se observan
entre bordeau y castaño
oscuro.
- COLORACION DE
HEMATOXILINA -EOSINA
(H&E)
- TINCIONES ESPECIALES
- TINCIÓN TRICRÓMICA DE MASSON
- Es una técnica de coloración especial que
permite visualizar claramente las fibras de
colágeno tipo I que forman fibras gruesas o
haces Tiñe de azul oscuro el núcleo celular;
de azul claro, el colágeno y la mucinógeno y
de rojo el musculo, el citoplasma celular o la
queratina
- • 2x10 min en xileno para desparafinar • 2x10 min en
etanol 100º • 10 min en etanol 96º • 10 min en etanol 80º
• 10 min en etanol 50º • 5 min en agua destilada • 5 min en
Hematoxilina férrica de Weigert (10 min si el colorante
lleva más de 5 días hecho) • 5 min en agua corriente para
diferenciación • 3 min lavado en agua destilada • 5 min en
fucsinaescarlata. • 2 min lavado en agua destilada • 15 min
en ácido fosfomolíbdico al 5% en agua destilada. • 10 min
en verde luz al 2 % (puede ser sustituido por azul de
anilina). • Unos segundos en agua destilada. • 3 min de
diferenciación con ácido acético al 1% en agua destilada
• Deshidratado rápido, unos segundos, en etanol de
graduación creciente: 80º, 96º y 100º • 2x10 min en xileno
- • 2x10 min en xileno para desparafinar • 2x10 min en
etanol 100º • 10 min en etanol 96º • 10 min en etanol 80º
• 10 min en etanol 50º • 5 min en agua destilada • 5 min en
Hematoxilina férrica de Weigert (10 min si el colorante
lleva más de 5 días hecho) • 5 min en agua corriente para
diferenciación • 3 min lavado en agua destilada • 5 min en
fucsinaescarlata. • 2 min lavado en agua destilada • 15 min
en ácido fosfomolíbdico al 5% en agua destilada. • 10 min
en verde luz al 2 % (puede ser sustituido por azul de
anilina). • Unos segundos en agua destilada. • 3 min de
diferenciación con ácido acético al 1% en agua destilada
• Deshidratado rápido, unos segundos, en etanol de
graduación creciente: 80º, 96º y 100º • 2x10 min en xileno
- Es una técnica de coloración especial que
permite visualizar claramente las fibras de
colágeno tipo I que forman fibras gruesas o
haces Tiñe de azul oscuro el núcleo celular;
de azul claro, el colágeno y la mucinógeno y
de rojo el musculo, el citoplasma celular o la
queratina
- TINCIÓN TRICRÓMICA DE GOMORI
- Esta técnica combina un colorante plasmático
(cromotropo 2R) y un colorante de fibras conectivas
(verde luz/azul de anilina) en una solución de ácido
fosfotúngstico y ácido acético glacial.
- • 2x10 min en xileno para desparafinar. • 2x10 min en
etanol 100º • 10 min en etanol 96º • 10 min en etanol 80º
• 10 min en etanol 50º • 5 min en agua destilada. • 1h
líquido de Bouin a 56-60 ºC, o 24 h a temperatura
ambiente • Lavados en agua destilada hasta que
desaparezca el color amarillo. • 10 min en hematoxilina
de Weigert. • 5 - 10 min en agua corriente. • 15 min en
solución tricrómica. • 1 min en ácido acético al 1 %. • 30 s
en agua destilada • 1 min en etanol 100º • 1 min en etanol
100º • 2 min en xileno • 3 min en xileno • Montado de las
secciones
- • 2x10 min en xileno para desparafinar. • 2x10 min en
etanol 100º • 10 min en etanol 96º • 10 min en etanol 80º
• 10 min en etanol 50º • 5 min en agua destilada. • 1h
líquido de Bouin a 56-60 ºC, o 24 h a temperatura
ambiente • Lavados en agua destilada hasta que
desaparezca el color amarillo. • 10 min en hematoxilina
de Weigert. • 5 - 10 min en agua corriente. • 15 min en
solución tricrómica. • 1 min en ácido acético al 1 %. • 30 s
en agua destilada • 1 min en etanol 100º • 1 min en etanol
100º • 2 min en xileno • 3 min en xileno • Montado de las
secciones
- Esta técnica combina un colorante plasmático
(cromotropo 2R) y un colorante de fibras conectivas
(verde luz/azul de anilina) en una solución de ácido
fosfotúngstico y ácido acético glacial.
- TÉCNICA DEL ROJO CONGO
- Se usa para teñir preparaciones microscópicas,
especialmente en tinciones para el citoplasma y
los eritrocitos. Verde manzana por
birrefringencia de tinciones de rojo congo bajo
luz polarizada es indicativo de presencia de
fibras amiloides
- • Desparafinado. Estufa durante 30 min. a 60º. • Alcohol
absoluto-5min. • Alcohol 96º-5min. • Alcohol 70º-5min.
• Lavar en H2O destilada. • Hematoxilina de Carazzi o de
Weigert 10 min. • Lavar en agua corriente - 10 min.
• Solución Rojo Congo - 10 min. • Lavar en agua corriente -
5 min. • Yoduro potásico --3-4 min. • Lavar con agua
corriente. • Alcohol de 70º • Alcohol de 96º. • Alcohol
absoluto. • Xilol.
- • Desparafinado. Estufa durante 30 min. a 60º. • Alcohol
absoluto-5min. • Alcohol 96º-5min. • Alcohol 70º-5min.
• Lavar en H2O destilada. • Hematoxilina de Carazzi o de
Weigert 10 min. • Lavar en agua corriente - 10 min.
• Solución Rojo Congo - 10 min. • Lavar en agua corriente -
5 min. • Yoduro potásico --3-4 min. • Lavar con agua
corriente. • Alcohol de 70º • Alcohol de 96º. • Alcohol
absoluto. • Xilol.
- Se usa para teñir preparaciones microscópicas,
especialmente en tinciones para el citoplasma y
los eritrocitos. Verde manzana por
birrefringencia de tinciones de rojo congo bajo
luz polarizada es indicativo de presencia de
fibras amiloides
- TECNICA DE GRIMELIUS
- Se utilizan principalmente para la identificación
de las células neuroendocrinas y sus tumores,
también para la demostración de fibras de
reticulina, melanina y calcio
- • Desparafinar é hidratar. • Solución de Plata 58* a
60*C…3Hrs. • Lavar en Agua. • Solución de
Hidroquinona 40* a 45*C…1:30Hrs. • Lavar en Agua.
• Deshidratar, Aclarar y Montar.
- • Desparafinar é hidratar. • Solución de Plata 58* a
60*C…3Hrs. • Lavar en Agua. • Solución de
Hidroquinona 40* a 45*C…1:30Hrs. • Lavar en Agua.
• Deshidratar, Aclarar y Montar.
- Se utilizan principalmente para la identificación
de las células neuroendocrinas y sus tumores,
también para la demostración de fibras de
reticulina, melanina y calcio
- TINCIÓN TRICRÓMICA DE MASSON
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