Método utilizado para pesquisa de cistos de
protoziários e ovos de helmintos; 1- Dissolver cerca de
5g de fezes em 10ml de água e filtrar em gaze dobrada
em quatro. 2- Depositar o material em tubo cônico de
centrífuga e centrifugar a 1500 rpm por 2 minutos. 3-
Desprezar o sobrenadante e ressuspender novamente
em 10 ml de água. 4-Repetir os passos 2 e 3 até que o
sobrenadante apresente-se claro. 5-Adicionar 10 ml de
sulfato de zinco (ZnSO2) 3 %, homogenizar e centrifugar
a 1500 rpm por 2 minutos. 6-Recolher com alça de
platina a película superficial, adicionar uma gota da
solução de lugol e observar ao microscópio.
Método de Willis
Método específico para pesquisa de ovos de Ancilostomídeo.
1-A solução saturada de cloreto de sódio é feita adicionando
aproximadamente 40g de NaCl a 100mL de água sob
aquecimento até saturação. 2- Colocar uma quantidade de
fezes em uma cuba contendo a solução saturada de cloreto
de sódio, dissolver as fezes nesta solução e acrescentar água
até a borda. 3- Colocar sob a borda da cuba uma lâmina de
vidro quase tocando a solução saturada e deixar de 30 a 45
minutos . 4- Após este tempo, inverter a lâmina rapidamente
e observar ao microscópio.
Sedimentação
Método de HOFFMAN, PONS & JANER
Para pesquisa de cistos de protozoários e ovos de
helmintos. 1- Dissolver cerca de 4g de fezes em 10 ml de
H2O em frasco pequeno 2- Filtrar em gaze dobrada em
quatro, utilizando um cálice de sedimentação 3- Completar
o cálice com água e homogeneizar com bastão de vidro. 4-
Deixar em repouso de 2 a 24 horas. 5- Com uma pipeta de
pasteur, retirar uma amostra do fundo do vértice do cálice.
6- Examinar ao microscópio, adicionando uma gota da
solução de lugol.
Método de Ritchie
Utilizado na pesquisa de cistos de protozoários. 1-
Idêntico ao método de FAUST até o ítem 4. 2-
Adicionar cerca de 8 ml de formol a 10%,
homogenizar, descansar por 10’ a 20’. 3- Adicionar
cerca de 2 ml de éter, agitar vigorosamente e
centrifugar a 1500 rpm por 2 minutos.
Métodos quantitativos
Método de Kato Katz
Utilizado principalmente na pesquisa de ovos de S. mansoni e
outros helmintos.1- Depositar uma pequena quantidade de
fezes sobre uma folha de papel higiênico colocando a tela por
cima e pressionando com a paleta. 2. Colocar sobre uma lâmina
de vidro a placa de plástico e depositar no centro do orifício as
fezes que ultrapassaram as malhas da tela (40 - 60 mg). 3.
Comprimir as fezes no orifício da placa até completá-lo. 4.
Sobrepor a lamínula de celofane e inverter a preparação
realizando pressão com o polegar sobre a lâmina até obter uma
uniformidade do material. 5. Deixar em repouso por cerca de
60 minutos a temperatura ambiente. 6. Contar todos os ovos
encontrados e multiplicar o total por 24, resultando em
ovos/grama de fezes.
Método de Stoll e Housher
Utiliza-se a solução de NaOH 0,1N que
saponifica as gorduras das fezes e
mantendo a suspensão clara. A estimativa
de ovos por grama varia, utilizando o FC
conforme natureza das fezes
Métodos diretos
Exame direto a fresco
Utilizado para pesquisa
trofozoítos e protozoários.
1- uma gota de sangue
colhido com
anticoagulante. 2-
colocado entre lamina e
lamínula. 3- levada ao
microscópio.
Método de Stront
Utilizado para pesquisa de trofozoítos
e protozoários. 1- Sangue coletado em
tubo capilar. 2- centrifuga-se. 3-
examinar na lamina o material de
interface entre hemaceas e leucócitos.
Preparação corada
1- Esfregaço e gota
devem ser corados com
método de Giemsa ou
Leishman. Permite a
detecção e diferenciação
de tripomastigotas de T.
cruzi e T. rangeli.
Método de Graham
Utilizado para pesquisa de ovos
de E. vermicularis. 1- Fita
adesiva transparente em uma
espátula, com a parte adesiva
para fora. 2- pressiona-se a
espátula contra as pregas
anais. 3- coleta-se a fita e no
momento do exame pinga-se
uma gota de xileno e a
pressiona contra lâmina.
Leva-se ao microscópio.
Método de isolamento
de larvas
Método de Baermann e
moraes
1-Colocar a água aquecida no funil com o tubo de
látex vedado pela pinça de Mohr, quantidade
suficiente para tocar a extremidade inferior da
peneira contendo as fezes. 2-Depositar pequena
quantidade de fezes sobre a peneira contendo
gaze e deixar em repouso por 45 a 60 minutos.
3-Após este tempo, soltar a pinça de Mohr e deixar
que o material escorra para um tubo de hemólise.
4-Centrifugar o material em baixa rotação e
observar o sedimento em objetiva de 10x. Este
método é específico para a pesquisa de larvas de
S. stercoralis.
Método de RUGAI, MATTOS &
BRISOLA
1- Estender, sobre a abertura de um recipiente
contendo fezes, gaze dobrada quatro vezes; 2- Encher
com água aquecida a 40-45°C, um copo cônico de
sedimentação; 3- Transferir o recipiente com as fezes
para o interior do copo cônico de sedimentação; 4-
Deixar em repouso durante 60 minutos. 5. Colher o
sedimento, no fundo do copo cônico, com pipeta
capilar longa. Alguns autores recomendam retirar o
recipiente do copo Cônico antes da colheita do
sedimento. Entretanto, outros preferem manter o
recipiente, para evitar o revolvimento do líquido;
Ziehl Nelsen
Modificado
Para pesquisa de oocistos, onde é
realizado um esfregaço, este é corado
com caribol- fuccina, lavado com etanol
até interromper cor. É feita a lavagem e
adicionado azul de metileno. Lava-se
novamente e observa na objetiva de
100x.