bichromatische analyse:
kwantitatieve analyse van 2
(binaire) mengsels met
overlappende absorptiespectra
zuurstofverzadiging van Hb en
de configuratie van tetracyclines
fotometrische titratie: titratie
waarbij continu de absorptie
verandering gemeten word
densitometrie: absorptie of
transmissie gemeting in de
vaste fase dmv het lezen van
lichtgevoelige materialen
serumeiwitten
IR spectrofotometrie
NIR: snelle poeders analyseren (nabij infra rood)
IR: spectroscopie voor structurele indentificatie van
moleculen gebaseerd op trillingsfrequenties van de
chemische verbindingen
turbidimetrie:
voor het meten
van de
absorptie bij
suspensies
wet van Bouger Lambert Beer: relatie
tussen lichtabsorpte en het materiaal,
alleen geldig bij monochromatisch licht
bij een constante temperatuur
T=P/Po=10^-abc
A=log1/T=abc
a=golflengte, b=weglengte, c=concentratie
hoogste absorptiesignaal
= hoogste gevoeligheid en
kleinste relatieve fout
kleine afwijking in golflengte
instellen geeft minimale fout
bij aflezen van de absorptie
de fotometer
onderdelen
lichtbron
UV: deuteriumlamp
VIS: wolfraam tungsten lamp
monochromator met filter prisma
of rooster voor respectievelijk het
verkrijgen van een nauwe
golflengteband, lichtbreking,
dispersie en diffractie
(verstrooiing en afbuiging)
kuvettenhuis
detector
versterker
afleeseenheid
voor het omzetten van een
lichtsignaal naar een elektrisch
signaal
absorptiewaarden
controleren met
ijkfilters of
bekende
oplossingen
een kuvet vullen met
oplossing die alle licht
absorbeert, minder
verstrooiing dus meer
lineair bereik
controle wet van BLB om
lineairiteit te controleren
Emissie fotospectrometrie
fluorimetrie: na belichten gaat
het bestraalde zelf licht
uitzenden. als het langer duurd
heet het fosforescentie
fluorofoor: deel van
molecule dat licht geeft
intensiteit: F = quantumopbrengst (Io -I)
fluors: fluorescende moleculen met een
hoge quantumefficientie
starre aromatische ringen
geconjugeerde dubbele bindingen
hoog molaire absorptiecoefficient
elektron donerende groepen zoals NH2
dovers of quenchers: verbindingen of ionen
die door interactie met een geexciteerd
fluorofoor een complex vormen dat de
excitatieenergie verliest in de vorm van
warmte
bij enzymbepalingenm
hormonen en farmaca
analyse, aminozuren
topografie
nefelometrie: voor het
meten van de intensiteit
van het verstrooide licht
bij suspensies
nefelometrie en turbidimetrie
enkel aanwenden bij gebrek
aan beter
serumflocculatietesten,
inmmunoglobuline
dosering of bepaling