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11521588
Transformación bacteriana
Descrição
Diagrama de flujo laboratorio #13. Biologia celular y molecular 2 UdeA
Sem etiquetas
medio lb
colonia bacteriana
Fluxograma por
Fredy Romero Menco
, atualizado more than 1 year ago
Mais
Menos
Criado por
Fredy Romero Menco
mais de 6 anos atrás
2
0
0
Resumo de Recurso
Nós do fluxograma
TRANSFORMACIÓN BACTERIANA
DIA 1
DIA 2
En un tubo eppendorf de 3 ml colocar alrededor de 200 µl de células competentes Escherichia coli DH5α
Adicione 20 µl del ADN a introducir en la bacteria
Mezclar cuidadosamente por inmersion e incubar en hielo por 20 min
Dar un choque térmico incubando a 42°C, de 30 - 60 "
Transferir inmediatamente a un baño de hielo por 10 min
Adicionar 1 ml de medio LB liquido
Incubar a 37 °C con agitación continua durante una hora
Plaquear en medio LB sólido que contiene antibiotico de selección apropiado (Kanamicina)
Cultivar las bacterias en caja de Petri, boca abajo, toda la noche, en incubadora a 37 °C
Observar directamente los resultados en las cajas de Petri
Determinar el número de unidades formadoras de colonia
Unidades Formadoras de Colonia (UFC). Unidad formadora de colonia por centimetro cuadrado. Unidades formadoras de colonia por ml.
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