enzimas

Nós do fluxograma

• Efecto de la concentración de enzima, el pH y la Temperatura sobre la Actividad Enzimática

• Catálisis enzimática.

• Las enzimas son catalizadores biológicos que aumentan las velocidades de las reacciones bioquímicas.

• solo actúa sobre determinadas moléculas, denominadas sustratos mientras dejan el resto del sistema sin afectar.

• puede contener en promedio alrededor de 3000 enzimas diferentes.

• Es homogénea porque el sustrato y la enzima están presentes en disolución acuosa.

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• Pardeamiento enzimático

• La coloración café oscuro en la superficie de   frutas y vegetales, se llama pardeamiento, y se debe a la enzima tirosinasa

• La coloración café en un pigmento muy oscuro llamado melanina.

• monofenoloxidasa sobre el aminoácido tirosina, se va convirtiendo secuencialmente en dopa, dopaquinona y dopacromo (café oscuro),

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• la velocidad de la reacción en términos de la cantidad de L-metildopacromo que se va formando, o la de L-metildopa que va reaccionando:

• La medida de la absorbancia a través del tiempo sirve para cuantificar la velocidad de la reacción

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• Obtención del extracto enzimático

• Es una  fracción de material animal, vegetal o microbiano, que contiene una mezcla de varias sustancias. 

• La preparación general de un extracto enzimático se inicia con la adición al material seleccionado una solución amortiguadora.

• Luego, se tritura en un mortero, se filtra y centrifuga para separar los residuos poco solubles.

• Que se caracteriza por presentar actividad de una o varias enzimas.

• Medida de la actividad enzimática

• Las velocidades de varias reacciones enzimáticas se pueden usar para comparar la eficiencia de las enzimas en términos de la cantidad usada de éstas

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• Si se conoce con precisión la concentración molar de la enzima usada, la expresión anterior se llamará actividad molar de la enzima:

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• Si no se conoce las cantidades exactas de las enzimas, se puede usar como factor de comparación el volumen de los extractos enzimáticos

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• Variables que afectan la actividad enzimática

• Las enzimas son macromoléculas proteínicas cuya actividad catalizadora se ve influenciada por varios factores

• concentración del sustrato y de la enzima, la ausencia o presencia de cofactores, inhibidores y efectores, el aumento o disminución de la temperatura y las variaciones del pH.

• Para  garantizar el óptimo funcionamiento de una enzima, se tendrá que proceder a la evaluación de su actividad catalítica.

• midiendo la velocidad inicial de la reacción enzimática en función , determinando la presencia o ausencia de un sustrato o de un producto de la reacción

• Efecto de la concentración de la enzima sobre la velocidad de la reacción

• La evaluación del efecto de la concentración de la enzima se  hizo en la región de la curva hiperbólica de Vi vs [S]

• la cinética es de orden cero con respecto al sustrato. Ahí, la enzima se encuentra completamente saturada y habrá sustrato en exceso.

• Al adicionar más cantidad de enzima, se encontró un aumento lineal en la velocidad de reacción, proporcional a la cantidad de enzima agregada.

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• Efecto del pH sobre la actividad enzimática

• La mayoría de las enzimas poseen un pH característico al cual su actividad es máxima; por encima o por debajo de ese pH la actividad disminuye.

• La relación entre el pH y la actividad de cualquier enzima depende principalmente del comportamiento ácido-base de la enzima y del sustrato.

• La forma de la curva de actividad-pH varía con la concentración del sustrato, ya que el valor de KM de muchas enzimas varía con el pH.

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• Efecto de la temperatura sobre la actividad enzimática

• la velocidad de las reacciones catalizadas por enzimas se incrementa en general con la temperatura.

• La velocidad de muchas reacciones enzimáticas se duplica, aproximadamente, por cada 10 ºC de aumento de la temperatura.

• las enzimas, al ser proteínas, se desnaturalizan por la acción del calor y se inactivan cuando la elevación de la temperatura sobrepasa un cierto punto.

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• Efecto de un inhibidor

• son sustancias de diferentes naturalezas químicas, que pueden unirse a diferentes lugares de la enzima o de los complejos enzimas sustratos de forma covalente o no covalente.

• Hace que la reacción se dé normalmente a una velocidad menor a la que se da cuando la enzima está libre. Dependiendo del tipo del inhibidor, la enzima puede inhibirse temporal o permanentemente.