Fijacion:n este paso el tejido obtenido se coloca en una sustancia fijadora, generalmente líquida, para evitar los
cambios post-mortem y para lograr conservar la forma original del tejido. Unos de los fijadores más usado es el
formol al 10% (formaldehído).
Físicos Los fijadores
físicos se basan bien en
una congelación muy
rápida del tejido o bien
en la aplicación de calor
elevado
La congelación rápida.
La crioprotección. La
criodesecación
La fijación por calor no es
frecuente en histología, puesto
que produce deterioros de los
tejidos.
Químicos Los métodos químicos
utilizan soluciones acuosas
compuestas por moléculas fijadoras
que establecen puentes entre las
moléculas del tejido,
manteniéndolas en sus lugares
originales e impidiendo su
degradación. Hay que considerar
que los fijadores químicos afectan al
tejidos tanto física como
químicamente. Los efectos físicos
suelen ser retracciones o
distensiones, y la mayoría endurecen
el tejido
Inmersión. En el método de
inmersión las piezas de tejido se
sumergen en la solución fijadora.
Perfusión. Por este
procedimiento la solución
fijadora se introduce a través del
sistema circulatorio por el cual
accede a todas las células del
tejido gracias a la red de
capilares
Dshidratacion: La mayoría de los medios
de infiltración (la matriz de soporte sólido
para hacer cortes de muestras de tejidos)
son hidrofóbicos, por tanto el agua debe
ser eliminada de los tejidos antes de
porcesados posterioes. Hay dos métodos
generales para deshidratar tejidos.
Deshidratación usando una serie de
solventes en gradiente- etanol, acetona
Deshidratación rápida Los reactivos para una
deshidratación rápida están reservados
generalmente para las técnicas de infiltración en
plástico. Sin embargo, pueden ser aplicadas
para la infiltración en parafina. El método usa
los disolventes orgánicos metil cellosolve (MC) ,
acetonitrilo, o 2,2-dimetoxipropano (DMP) en un
porceso de eliminación rápida de agua.