técnicas para el analisis e interpretacion de la
informacion genetica
RFLPs (Fragmentos de Restricción de Longitud
Polimórfica)
desarrollada por Sir Alec Jeffreys en 1985.
tecnica utilizada en los estudios moleculares, y consiste en la combinacion de dos metodos
basicos en el trabajo molecular
en primer lugar se realiza una amplificacion por PCR del fen que
queremos estudiar
posteriormente se realiza la digestion del producto amplificado con enzimas
de restriccion
es util para detectar pequeñas inserciones en determinados
fragmentos de restriccion de un gen
ciertas mutaciones puntuales en un gen pueden crear
nuevos sitios de restriccion o hacer desaparecer aquellos
presentes en un gen normal
lo que altera el patron de los fragmentos de
restriccion observables
en conclusion se pueden detectar dos tipos principales de polimorfismoque
pueden tener las cadenas de ADN
en el primero se encuentra el polimorfismo en el orden de las bases
nitrogenadas,en la secuencia genomica,el cual puede ser facilmente
identificado
en el segundo,el polimorfismo se presenta por el
tamaño de los fragmentos de adn ya sea por causa de
una insercion,una lesion o una duplicacion
PCR
fue ideada en 1989 por Kary B. Mullis
el objetivo de la PCR es producir suficiente ADN de la región blanco para
que pueda analizarse o usarse de alguna otra manera
amplifica más de un millón de
veces un ADN
La técnica de PCR es un procedimiento usado para amplificar los segmentos deseados de ADN
a través de la repetición de los ciclos de
son tres procesos en los que se someten a unos ciclos de
temperatura
desnaturalización (separación del ADN de doble cadena inducida por calor)
en este primer ciclo a una temperatura de 95
grados donde el ADN se desnaturaliza
la elongación (extensión de las secuencias cebadoras para formar
una nueva copia de la secuencia deseada)
el resultado es que en cada ciclo de temperaturas se iran
duplicandola cantidad de adn de nuestro fragmento ,despues
de 30 ciclos encontramos que nuestroadn estara presente en
un numero de dos copias
apartir de una unica copia llegaremos a mas
de mil millones de copias de nuestro
fragmento
El apareamiento (unión de cebadores específicos del segmento
deseado a una cadena parental de ADN)
en el segundo ciclo se enfrian colocando nucleotidos y anillandolos en sus
regiones correspondientes y una frase de elongacion a una temperatura de 32
grados donde la polimerasa incorpora los nucleotidos
este ciclo se repite de 25 a 35
veces donde en cada uno de ellos
se trata de una de las tecnicas de biologia molecular mas
importantes que existen por su sencillez experimental y la
cantidad de aplicaciones
consiste en obtener grandes cantidades de un fragmento
concreto de adn a partir de un molde
para generar este proceso necesitamos una serie de componentes
nucleotidos ,polimerasa(enzima que realiza la reaccion) y una
pareja de onigonucleitidos de sean especificos en nuestra
region de interes
en cuando una molecula de dna se duplica por
cada ciclo de reaccion,por lo que una serie de
ampliaciones se iran generando
Las STR
son secuencias cortas de ADN, con una longitud de 2 a 5 pares de bases,
son secuencias de ADN en las que un fragmento (cuyo tamaño va desde dos hasta seis pares de bases) se
repite de manera consecutiva.
La variación en el número de repeticiones, y no la secuencia repetida, crea
diferentes alelos.
Generalmente se encuentran en zonas no
codificantes del ADN
Son utilizados como marcadores moleculares en una
gran variedad de aplicaciones en el campo de la
genética
se usa estudios de poblaciones.
conformado por un motivo repetitivo, en el cual se encuentra contenido la secuencia repetida, y dos
regiones flanqueantes, las cuales se encuentran a ambos lados del motivo repetitivo.