Agrobacterium

Agrobacterium

Transfiere
1. T-DNA: en plasmido Ti o Ri (root-inducing)
  1. Vectores binarios
    1. Dos replicones
      1. Genes vir
      2. Regiones T-DNA
    2. Utilidad
      1. Funcionar en E.coli
    3. Propiedades
      1. Secuencia de borde (25pb) altamente conservados
      2. Genes de selección (e.g. resistencias)
      3. Múltiples sitios de corte
      4. Origen(es) de replicación
      5. Resisntencias a antibióticos en el cromosoma
  2. Alternativos
    1. Usar T-DNA desde el cromosoma
      1. Reduce: frecuencia de transformación, integración de transigentes
2. Plantas
3. Hongos
4. Células animales
5. a
6. Necesita:
  1. Secuencias de borde T-DNA para orientar y delimitar región de procesamiento del plásmido
  2. Genes vir en plásmido Ti/Ri (10 operones)
    1. Sentir compuestos producidos por heridas para activar VirA y VirG
      1. Compuestos fenicios
      2. Azucares
        percibidas por proteína ChvE
    2. Procesar T-DNA
      1. VirD1: helicasa
      2. VirD2: endonucleasa
        se une extremo 5´de hebra T, la guía afuera de la bacteria, dentro de célula vegetal y dentro del núcleo de la planta
    3. Secretar ADN-T y proteínas Vir por sistema de secreción tipo IV
      1. virB
        11 genes: forman poros en membrana bacteriana
      2. virD4
        Funciona como un factor de acoplamiento para unir VirD2-T al sistema IV de secreción
      3. Proteínas conocidas: VirD2, VirD5, VirE2, VirE3, VirF
    4. Participa en tráfico citoplásmico, ubicar el núcleo y en la integración al genoma del hospedero
      1. VirE2
        Protege hebra T
      2. VirD2 y VirE2
        hebra T al núcleo
      3. VirF
        Quita proteinas de habrá antes de integración al ADN-T
  3. Varios genes chu (virulencia cromosomal) en cromosomas bacterianos
    1. Involucrados en: síntesis de polisacaridos, maduración y secreción

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